HPLC法测定复方血竭凝胶中阿魏酸的含量
复方血竭凝胶由延胡索、血竭、乳香、当归、冰片5味中药组成,具有活血散瘀、消肿止痛、生肌止痒的功效。本试验选用阿魏酸作为指标成分,参考有关文献[1],建立了测定其含量的方法。通过方法学考察,本方法稳定性好,专属性强,可作为复方血竭凝胶的质量控制方法之一。
1 仪器与试药
色谱仪(四元泵,美国);超声波清洗器(HJ69-10L,北京中西远大科技有限公司)。阿魏酸对照品(批号0726-200208,中国药品生物制品检定所提供);复方血竭凝胶(本院自制)。甲醇(分析纯,上海振兴化工一厂),其他试剂均为分析纯,水为重蒸馏水。
Agilent 1100系列高效液相2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:ZORBAX SB-C18(5 μm,4.6 mm×250 mm);流动相:甲醇-0.3%冰醋酸(35∶65);检测波长:320 nm;柱温:35 ℃;流速:1.0 mL/min。阿魏酸对照品溶液及供试品溶液均在11 min左右出现特征吸收峰,阴性对照在阿魏酸位置处无干扰。见图1。 教师论文发表
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备
精密称取减压干燥48 h的阿魏酸对照品1.55 mg于50 mL量瓶中,加70%甲醇溶解定容,制成1 mL含阿魏酸31 μg的对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的制备
2.2.3 阴性对照溶液的制备
按处方比例和制备工艺制备不含当归的阴性样品,按供试品溶液制备方法制得阴性对照溶液。
精密量取“2.2.1”项下对照品储备液0.5、1、2、3、4、5 mL分别置10 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀。按上述色谱条件依次进样20 μL,以进样量为横坐标,峰面积积分值为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程:Y=3 376.5X-4.078 5,r=0.999 9,表明阿魏酸在0.031~0.310 μg范围内线性关系良好。同时将对照品溶液稀释后进样,检得最低检测限为5.95 μg/mL。
2.4 精密度试验
教师论文发表
2.5 稳定性试验
吸取同一供试品溶液10 μL,分别于0、1、2、4、6、8 h进样,测定峰面积,RSD=1.90%。表明至少8 h内供试品溶液仍保持稳定。
2.6 重复性试验